K7M2培養(yǎng)要點
近期有朋友反映K7M2這個細胞培養(yǎng)過程中形態(tài)呈現(xiàn)出細胞觸角多、拉絲的特點,那這到底是不是正常生長形態(tài)呢?今天我們來了解下這個細胞正常生長形態(tài)及相關(guān)要點。
附上K7M2(小鼠骨髓瘤成骨細胞)簡介:
▲ 形態(tài)特征:成骨細胞樣
▲ 生長特征:貼壁
▲ 種 屬:小鼠源
▲ 組織來源:骨
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推薦培養(yǎng)試劑
▲ 基礎(chǔ)培養(yǎng)基:DMEM,high glucose(CellCook:CM2016或Gibco cat:11995,或同配方)
▲ 血 清: 南美胎牛血清(CellCook cat:CM1002L)
▲ 傳代方法:1:2-1:4傳代(培養(yǎng)面積比)
▲ 傳代方式:消化2-3分鐘
▲ 換液頻率:2~3天換液1次
▲ 凍存液配方:DMEM,high glucose+10%FBS+ 1 0%DMSO
▲ 難度等級:++
▲ 特征特性:抗原表達:CD31陽性;產(chǎn)物:八因子、整合唾液酸蛋白(BSP)、biglyan、decorrin、villin2(ezrin)。骨唾液酸蛋白,biglyan,decorrin和osteopontin的表達顯示其骨家族細胞特性。

廢話不多,直接放ATCC官方圖如下:

CellCook圖片:

培養(yǎng)中需注意幾點:
▲ 1、該細胞有密度依賴,密度低時生長緩慢,需注意細胞培養(yǎng)密度,保證培養(yǎng)效果。
▲ 2、細胞復(fù)蘇時注意“快融”原則,宜一分鐘內(nèi)全部溶解。
▲ 3、配制凍存液時注意DMSO配制時會發(fā)熱易灼傷細胞,所以需等凍存液冷卻后再使用。
▲ 4、傳代消化時一般消化2-3min,消化時間可根據(jù)細胞消化程度進行適當(dāng)調(diào)整,注意勿消化過度。
▲ 5、該細胞對外界刺激較敏感,建議培養(yǎng)時使用新鮮DMEM高糖培養(yǎng)基,注意培養(yǎng)基顏色變化,如變紫需及時更換新鮮培養(yǎng)基。
























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