收到T25活細胞時，如何操作？
? 寄送過程中，為避免細胞脫落死亡，T25瓶為灌液狀態(tài)出庫寄送。收到細胞請檢查培養(yǎng)瓶外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即聯(lián)系我們。
? 將原封的T25 瓶用酒精擦拭后轉(zhuǎn)移置37 °C， 5%CO2培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至37 °C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞再附著生長。穩(wěn)定2-4小時后，于生物安全柜/超凈臺內(nèi)操作：吸出全部灌液培養(yǎng)基，更換新鮮的完全培養(yǎng)基換液處理，或細胞已長滿，則將細胞做1：2傳代培養(yǎng)。
收到細胞凍存株時，如何操作？
? 收到細胞株包裹時，請檢查細胞株冷凍管是否有解凍、漏液等情況，若有請立即聯(lián)系我們。
? 細胞株請盡快復(fù)蘇培養(yǎng)，或及時轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
接收常見問題
剛接收細胞大量漂浮成團怎么辦？
一些本身貼壁比較松散的細胞比如293T細胞，收到活細胞時有可能大部分細胞脫離培養(yǎng)瓶壁漂浮起來，顯微鏡下找不到細胞，只能看到肉眼可見的細胞團，是正?，F(xiàn)象。
處理方法
參照以下方式處理即可恢復(fù)正常：
收到細胞后請先置于培養(yǎng)箱中穩(wěn)定2~4h后再進行下一步處理，不建議放置培養(yǎng)箱過夜后處理；
將培養(yǎng)瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基轉(zhuǎn)入50mL離心管，1000rpm離心5min收集漂浮的細胞；
去掉上清，加入1mL左右0.25%胰酶（含EDTA，無鈣鎂離子）重懸細胞輕輕吹散至沒有大細胞團，放入培養(yǎng)箱消化1min左右；
貼壁部分的細胞采用常規(guī)的消化流程即可；
消化1min（懸?。?2-3min（貼壁）后，加入2mL完全培養(yǎng)基混勻終止消化，用移液槍輕輕吹打細胞懸液，使細胞團分散成單細胞，將所有細胞收集到一起1000rpm離心5min；
去掉上清，加入完全培養(yǎng)基混勻，視細胞量決定是1:2傳代還是1:3傳代（由于細胞運輸有損傷，首次傳代建議比平時養(yǎng)密度稍高）；
顯微鏡下觀察細胞是否有分散成單細胞現(xiàn)象，若有明顯很大的細胞團需要重復(fù)上述步驟二次消化；
第二天及時觀察細胞貼壁情況，若貼壁細胞量過多，造成細胞堆積，貼壁24h后再次傳代分瓶，若密度正常則繼續(xù)生長，不建議換液，貼壁48h后再換液去掉不能貼壁的細胞。
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收貨處理后，細胞不貼壁
很多細胞在接收傳代后可能會出現(xiàn)細胞成團漂浮、不貼壁的情況，例如RAW 264.7細胞會經(jīng)常出現(xiàn)這種情況，不用擔(dān)心，處理一下即可恢復(fù)。
處理方法
參照以下方式處理即可恢復(fù)正常：
把細胞收集離心，用1mL完全培養(yǎng)基重懸，慢慢地，輕輕地吹打，直到細胞被吹成單細胞，重新鋪板。
RAW 264.7脫落后傾向于抱團，抱團時細胞是活著的，但很難貼壁。
一定要把聚成團的細胞吹散成單細胞，不然細胞很難重新貼壁。
收貨處理后，小部分細胞漂浮怎么辦？
受運輸影響一些細胞可能會漂浮，放入培養(yǎng)箱穩(wěn)定后可重新貼壁，若穩(wěn)定后還有極少量細胞不貼壁可直接換液丟棄。
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