為什么要進行細胞系鑒定？
據(jù)統(tǒng)計，目前有超過30%的細胞系被錯誤辨識或受到交叉污染。2010年《國際癌癥雜志》(IJC)統(tǒng)計出一列表，在346篇文章中，有103篇存在細胞被Hela細胞污染的情況。最可怕的錯用是在瑞典某大學的一個研究組里，該研究組從1988年起就錯誤的使用了Hela，以為是lnt-407細胞系，并因此在從1988到2011年里發(fā)表了41篇論文，全部是錯的。這些文章發(fā)在Oncogen, JBC, Carcinogenesis, PLoS One, J Cell Physiol, Cancer Res, Br J Cancer, Biochem J, Exp Cell Res等眾多高質量的雜志上。
近年來，大量研究表明 STR 基因分型方法是進行細胞交叉污染和性質鑒定的最有效和準確的方法之一，STR基因分型應用于細胞鑒定已被ATCC等機構強烈推薦。美國的ATCC 細胞庫、德國的DSMZ細胞庫以及日本的JCRB細胞庫等為STR 分型提供了各細胞株的數(shù)據(jù)供比對。越來越多的雜志在投稿時要求撰稿人提供細胞STR分析數(shù)據(jù)，STR已被ATCC等機構作為細胞鑒定的金標準。
什么是細胞系STR鑒定？
● STR（Short tandem repeats，短串聯(lián)重復序列）基因位點由長度為3~7個堿基對的短串聯(lián)重復序列組成，這些重復序列廣泛存在于基因組中，可作為高度多態(tài)性標記，被稱為細胞的DNA指紋，其可通過PCR（聚合酶鏈式反應）來檢測。
● STR基因座位上的等位基因可通過擴增區(qū)域內(nèi)重復序列的拷貝數(shù)的不同來區(qū)分，在毛細管電泳分離之后可通過熒光檢測來識別。隨后通過一定的計算方法，所得的STR分型結果與權威的細胞STR數(shù)據(jù)庫比對，從而推算出樣品所屬的細胞系。
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鑒定流程
什么時候需要細胞系STR鑒定？
發(fā)表文章或申請課題經(jīng)費前；
使用細胞進行臨床治療（試驗）前；
準備凍存保種或已凍存多年的細胞；
一個涉及到細胞試驗項目開始/結束時；
新得到的細胞或實驗室培養(yǎng)5代以上的細胞；
細胞系表現(xiàn)不穩(wěn)定或結果與預期差別較大；
異體細胞移植后嵌合情況檢查。
這樣將避免由于細胞系交叉污染或身份誤認，導致的金錢、時間的浪費和無效實驗數(shù)據(jù)的產(chǎn)生。
人源細胞的鑒定-STR鑒定
STR基因分型已被ICLAC、ATCC等權威機構作為金標準應用于細胞鑒定，目前主要基于國際身份認證委員會的標準。依據(jù)該標準，可以通過多重熒光PCR技術，對人源常見的20個STR位點以及1個性別決定位點進行檢測。
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小鼠細胞的鑒定-STR鑒定
國內(nèi)STR基因分型常見人類STR，當科研用到小鼠源細胞，該怎么提供STR鑒定結果呢？
賽庫是國內(nèi)首家推出小鼠源細胞STR鑒定的生物公司，參考ATCC細胞鑒定金標準ANSI/ATCC ASN-0002-2011——STR基因分型技術，創(chuàng)建小鼠源細胞DNA指紋檢測系統(tǒng)，聯(lián)用18個位點（人源細胞系鑒定我們采用21位點），多種熒光探針標記，精準鑒別小鼠源細胞。賽庫生物擁有5年以上細胞鑒定經(jīng)驗，為您提供專業(yè)的細胞鑒定服務。
樣品要求
樣品要求
活細胞：T25培養(yǎng)瓶，60%-70%密度，細胞數(shù)>106個，寄出前灌滿培養(yǎng)基封口膜密封蓋子，常溫運輸。
細胞沉淀/凍存細胞：細胞數(shù)量需≥106，干冰運輸。
DNA樣本：OD260/OD280=1.8~2.0，DNA濃度≥50ng/uL，DNA體積≥20uL。
賽庫生物--小鼠短串聯(lián)重復序列的多重擴增體系及檢測試劑盒發(fā)明專利
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