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Hep G2人肝癌細(xì)胞。該細(xì)胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織。該細(xì)胞表達(dá)甲胎蛋白、白蛋白、Α-2-巨球蛋白、Α-1-抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、Α-1-抗凝乳蛋白酶、結(jié)合珠蛋白、銅藍(lán)蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、Α-1酸性糖蛋白、Α-2-HS-糖蛋白、Β-脂蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白；表達(dá)胰島素受體和胰島素樣生長，適合用于肝細(xì)胞代謝方面的研究。

圖一：ATCC中Hep G2細(xì)胞形態(tài)

生長特性

上皮樣呈片狀的小島形態(tài)，容易抱團(tuán)聚集疊加生長：

圖二：Hep G2細(xì)胞

圖三：Hep G2細(xì)胞

培養(yǎng)條件

培養(yǎng)體系

MEM+10%胎牛血清（南美級別）+添加劑:1X 非必需氨基酸。

傳代比例

1:4傳代（培養(yǎng)面積比）。

傳代方式

0.25%胰酶消化5分鐘。

換液頻次

每周換液兩次。

倍增時間

25.65 小時（PubMed= 31378681); 50-60 小時 (DSMZ)。

凍存液配方

MEM+10%FBS+1X 非必需氨基酸+10%DMSO。

培養(yǎng)要點

細(xì)胞有堆疊生長特性，消化后需兩天貼壁至完全攤開；生長較慢。

常見問題

01 疊加生長

Hep G2細(xì)胞生長特性是緊密連接成片狀從四周延展增殖，形成一座座的小島狀，細(xì)胞在增殖過程中可能會看到輕微的細(xì)胞堆積點，屬于正常現(xiàn)象，所以消化所需時間較久，注意觀察，等待細(xì)胞自然脫落即可，切勿拍打培養(yǎng)瓶或過度吹打細(xì)胞，避免細(xì)胞損傷。

01 貼壁慢、漂浮細(xì)胞多

Hep G2細(xì)胞傳代后會有許多簇狀仍處于懸浮狀態(tài)，這是正?，F(xiàn)象，一般2-3天內(nèi)會緩慢粘附于培養(yǎng)瓶緩慢延伸進(jìn)行增殖。建議傳代后2天內(nèi)減少觀察和移動細(xì)胞。

當(dāng)凍存細(xì)胞進(jìn)行復(fù)蘇時，通常會出現(xiàn)大量漂浮細(xì)胞不貼壁，屬于正常情況，剛復(fù)蘇的細(xì)胞比較脆弱，建議3 天不要干擾，如果3天后漂浮細(xì)胞還很多，且漂浮細(xì)胞透亮圓潤，可以重新收集細(xì)胞1000rmp、離心5分鐘接種到新的培養(yǎng)瓶。