商品詳情
【培養(yǎng)條件】
DMEM/F12(CellCook cat:CM2012,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級(jí)別)
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC2101RM)
【傳代比例】
1:2傳代(培養(yǎng)面積比);3-4天傳1次先收集懸浮型細(xì)胞,再對(duì)貼壁型 細(xì)胞進(jìn)行消化,收集
【傳代方式】
消化1-2分鐘
【換液頻率】
2~3天換液1次
【凍存液配方】
DMEM/F12 +10%FBS+10%DMSO
【難度等級(jí)】
+++
【培養(yǎng)要點(diǎn)】
懸浮與貼壁混合,需要將培養(yǎng)基中的懸浮細(xì)胞與消化完成的貼壁細(xì)胞一 并離心收集再做傳代。消化時(shí)建議使用0.125%的胰蛋白酶,能緩解細(xì)胞消化后聚 團(tuán)的情況
【特征特性】
該細(xì)胞系來源于1970年建立的一神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者的轉(zhuǎn)移骨瘤灶細(xì)胞
SK-N-SH經(jīng)三次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。該細(xì)胞
顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。SH-SY5Y細(xì)胞的生長密度可高達(dá)1X106細(xì)
胞/cm2,生長成懸浮和貼壁混合生長,有的聚集成細(xì)胞叢。
藥篩:通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組,使細(xì)胞表
達(dá)熒光蛋白,在熒光顯微鏡下可以進(jìn)行觀察,標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢
測。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式,導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性,為增強(qiáng)細(xì)胞熒
光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。
熒光株培養(yǎng)條件與野生型細(xì)胞一致。正常培養(yǎng)過程中定期(一個(gè)月2-3次或頻
率自定)用終濃度4μg/mL的嘌呤霉素追加篩選,凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選
一次,不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。
【STR位點(diǎn)信息】