RPMI 1640(CellCook cat:CM2017,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)

1:4傳代（培養(yǎng)面積比）

消化6-10分鐘（培養(yǎng)箱消化）

每周換液2-3次

RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO

4T1是從410.4瘤株中未經(jīng)誘變篩得的6-硫鳥嘌呤抗性細胞株。當(dāng)注射到BALB/c小鼠中時，4T1自發(fā)產(chǎn)生高轉(zhuǎn)移腫瘤，可轉(zhuǎn)移到肺，肝，淋巴結(jié)和大腦，同時在注射部位形成始發(fā)灶。誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移時不需要摘除始發(fā)灶。4T1細胞在BALB/c小鼠中的生長與轉(zhuǎn)移特性與人體中的乳腺癌十分相近。這種腫瘤是人VI期乳腺癌的動物模型。4T1誘導(dǎo)的腫瘤在手術(shù)后及未手術(shù)情況下轉(zhuǎn)移的動力學(xué)相近，可以用作手術(shù)后及未手術(shù)模型。跟其他腫瘤模型相比，由于4T1的抗6-硫鳥嘌呤特性，微小的轉(zhuǎn)移細胞團(少到僅僅1個)也可在遠距離組織中檢測出來，比大
部分腫瘤模型都更加準確，因為不需要數(shù)結(jié)節(jié)數(shù)或者稱量靶標組織重量。
藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光素酶（Luciferase,Luc）的基因片段整合進細胞基因組，使細胞表達熒光蛋白，常用于構(gòu)建各類皮下、原位或轉(zhuǎn)移型的CDX腫瘤模型、活體動物體內(nèi)光學(xué)成像實驗和啟動子活性分析等。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式，導(dǎo)致細胞熒光表達量的不確定性，為增強細胞熒光表達量可進行抗性篩選。熒光株培養(yǎng)條件與野生型細胞一致。連續(xù)培養(yǎng)的細胞篩選頻率為1-2個月，篩選時，將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中，細胞正常培養(yǎng)傳代即可，每次篩選時間為一周，嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。長期凍存的細胞，復(fù)蘇后第二代待細胞狀態(tài)穩(wěn)定時，可進行篩選，維持陽性細胞比例。篩選過程中，建議不要使用細胞做實驗，抗生素會影響部分實驗結(jié)果。