商品詳情
【培養(yǎng)條件】
IMDM(CellCook cat:CM2011,或同配?)10%胎??清(CellCook cat:CM1002L,或更?級(jí) 別)
【推薦培養(yǎng)試劑】
配套完全培養(yǎng)基(CellCook cat:CC1901M)
【傳代比例】
1:4傳代(培養(yǎng)面積比)
【傳代方式】
消化2-3分鐘
【換液頻率】
2~3天換液1次
【凍存液配方】
RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO
【難度等級(jí)】
++
【培養(yǎng)要點(diǎn)】
需控制細(xì)胞密度,靜置培養(yǎng)后細(xì)胞會(huì)貼附
【特征特性】
該細(xì)胞是由Lozzio從?名53歲的慢性髓細(xì)胞性??病急變期的?性患者的胸?中分離建?的。該細(xì)胞曾被認(rèn)為來(lái)源于粒系,處于?度未分化階段;Anderson等?作了細(xì)胞膜特性的研究后,認(rèn)為該細(xì)胞是紅??病細(xì)胞系。該細(xì)胞是對(duì)?然殺傷細(xì)胞?度敏感的體外靶標(biāo),故?被?泛應(yīng)?于這??的研究。K562的原始細(xì)胞是?種具有多向分化潛能的造?系統(tǒng)的惡性腫瘤細(xì)胞,能?發(fā)分化為紅系、粒系和單核系的可辨識(shí)的祖細(xì)胞。該細(xì)胞表達(dá)CD7(25%)。
藥篩:通過(guò)慢病毒感染的?式將攜帶熒光素酶(Luciferase,Luc)的基因?段整合進(jìn)細(xì)胞基因組,使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋?,常?于構(gòu)建各類?下、原位或轉(zhuǎn)移型的CDX腫瘤模型、活體動(dòng)物體內(nèi)光學(xué)成像實(shí)驗(yàn)和啟動(dòng)?活性分析等。由于是?慢病毒轉(zhuǎn)染的?式,導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性,為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)?抗性篩選。熒光株培養(yǎng)條件與野?型細(xì)胞?致。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞篩選頻率為1-2個(gè)?,篩選時(shí),將嘌呤霉素直接添加到培養(yǎng)基中,細(xì)胞正常培養(yǎng)傳代即可,每次篩選時(shí)間為?周,嘌呤霉素終濃度為4μg/mL。?期凍存的細(xì)胞,復(fù)蘇后第?代待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定時(shí),可進(jìn)?篩選,維持陽(yáng)性細(xì)胞?例。篩選過(guò)程中,建議不要使?細(xì)胞做實(shí)驗(yàn),抗?素會(huì)影響部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果。