RPMI 1640(CellCook cat:CM2017,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)

1:4傳代（培養(yǎng)面積比）

消化2-3分鐘

2~3天換液1次

RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO

CT26細(xì)胞是被N-亞硝基-N-甲基脲烷（NNMU）誘導(dǎo)得到的未分化的小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞，該細(xì)胞的一個克隆形成的細(xì)胞系被命名為CT26.WT。CT26.WT被逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)化形成了一個致死性的亞克隆CT26.CL25，這一病毒載體含有l(wèi)acZ基因、編碼腫瘤相關(guān)抗原（TAA）和beta半乳糖苷酶。CT26.WT和CT26.CL25細(xì)胞在小鼠中生長速度和致死率都很相似，不同的是CT26.CL25細(xì)胞可以表達(dá)腫瘤相關(guān)抗原和beta半乳糖苷酶，因此這兩株細(xì)胞可以聯(lián)合用于免疫治療和宿主免疫反應(yīng)的研究。
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藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進(jìn)細(xì)胞基因組，使細(xì)胞表達(dá)熒光蛋白，在熒光顯微鏡下可以進(jìn)行觀察，標(biāo)記后的細(xì)胞非常容易進(jìn)行追蹤檢測。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式，導(dǎo)致細(xì)胞熒光表達(dá)量的不確定性，為增強(qiáng)細(xì)胞熒光表達(dá)量可進(jìn)行抗性篩選。正常培養(yǎng)過程中定期（一個月2-3次或頻率自定）用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選，凍存后復(fù)蘇也建議可以追加篩選一次，不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。