Alpha MEM(CellCook cat:CM2003,或同配方) 10%胎牛血清(CellCook cat:CM1002L,或更高級別)

1:3-1:6傳代(培養(yǎng)面積比)

消化2-3分鐘

每周換液2-3次

ALPHA MEM+10%FBS+10%DMSO

OP9細胞株源自新生的OP/OP 小鼠顱蓋。因編碼M-CSF的基因中的一個突變，它不能生成有功能的巨噬細胞克隆刺激因子(M-CSF)。M-CSF的存在對胚胎干細胞(ES)分化成血細胞而不是其他巨噬細胞有抑制功能。 OP9細胞可以用于與小鼠胚胎干細胞共培養(yǎng)以誘導胚胎干細胞分化成成紅血球來源的、骨髓來源的和B細胞譜系的血細胞。與OP9共培養(yǎng)不需要外源的生長因子或復雜的胚胎結(jié)構(gòu)。這個系統(tǒng)對研究造血細胞的發(fā)育和分化的分子機理有用。
藥篩：通過慢病毒感染的方式將攜帶熒光的基因片段整合進細胞基因組，使細胞表達熒光蛋白，在熒光顯微鏡下可以進行觀察，標記后的細胞非常容易進行追蹤檢測。由于是用慢病毒轉(zhuǎn)染的方式，導致細胞熒光表達量的不確定性，為增強細胞熒光表達量可進行抗性篩選。正常培養(yǎng)過程中定期（一個月2-3次或頻率自定）用終濃度4ug/mL的嘌呤霉素追加篩選，凍存后復蘇也建議可以追加篩選一次，不需要培養(yǎng)過程中每天都加藥。